8000rpm离心1分钟,上清DNA溶液转移至新的离心管中。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例2 以硅胶膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有硅胶膜的离心柱中,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)上海益启生物的土壤DNA提取操作是否简易?长宁区土壤DNA土壤DNA提取参数
-24 5G仪器和裂解介质E管同时使用可在40秒内快速裂解难处理样本,例如***孢子、内生孢子、革兰氏阴性菌和酵母等。释放出来的DNA经过硅胶基质离心纯化,得到的DNA可以直接进行下游PCR反应、限制性内切酶消化、电泳和任何其他所需的应用。产品特点:1.适用于不同类型的土壤样本,以及废水、污泥等样本。该试剂盒中不存在也不需要再使用有危害的有机试剂。3.DNA产量高、纯度高。4.去除腐殖酸和RCR抑制剂。应用实例:提取多种样本的500mg徐汇区土壤DNA提取土壤DNA提取保证质量——益启生物公司。
与现有技术相比,本发明技术克服了样品土壤来源的二氧化硅对DNA的吸附,从而减少了不必要的DNA损失,可达到获取高质量、高产量土壤尿液DNA目的。 附图说明 图1是本发明实施例1中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图2是本发明实施例2中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图3是本发明实施例3中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图4是本发明实施例4中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 具体实施方式 下面将结合本发明的附图,对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。
直接应用于下游实验。多:完美配合自动化核酸提取仪,实现高通量提取。广:多种环境土壤均能有效提取,适用性广,***匹配市面上大多数核酸提取仪和工作站。安:不使用酚、氯仿等有毒试剂,安全环保。PART.02。多重数据表明提取效果。MagBeads FastDNATM Kit for Soil用于提取不同类型土壤DNA,可直接用于PCR、酶切、测序等下游实验。提取不同类型土壤DNA收率及纯度结果:A260/A280比值在1.7~2.0范围视为提取效果良好,A260/A230比值大于买土壤DNA提取就找益启生物。
调节样本的含水量等因素来优化裂解条件·裂解不充分:增加物理破碎的时间和次数。·检查洗涤液中是否加入乙醇。·洗脱不充分:建议二次洗脱增加产量或提高洗脱体积。问题3:提取的DNA无法扩增怎么办?解决思路:· 检测DNA的浓度:过量的DNA模板也会抑制PCR反应。·样本DNA稀释之后可以扩增:样本中的腐殖酸等抑制物含量高。·确定PCR反应条件是否已优化:退火温度,时间,引物等等。·非特异条带:洗脱液中目的DNA的丰度可能比较低土壤DNA提取助力药物研发。徐汇区FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取参数
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更好的纯度,提取效果更稳定。SPINeasy DNA Kit for Soil(5preps)**试用装申请+反馈有奖活动正在进行中,欢迎关注公众号→点击MP产品→试用申请,填写申请信息,我们的工作人员审核后会尽快与您电话联系。划重点!!!添加微信客服:mpbiohelper,填写完整样品反馈记录即可获得惊喜礼品一份!数量有限,快火速申请!MP Biomedicals土壤基因组DNA提取试剂盒系列产品——满足多种提取需求!名称:FastDNA Spin Kit for Soil、SPINeasy Kit for长宁区土壤DNA土壤DNA提取参数
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